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水中细菌总数的测定

时间:2010-07-13 07:02 来源:未知 作者:云中雪 责任编辑:地理教师
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水中细菌总数的测定 

细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌的总数。本实验以1毫升水样在营养琼脂培养基中,于37摄氏度培养24小时后所生长的细菌菌落的总数,作为水体受细菌污染程度的标志。

工具与材料

培养皿,锥形瓶,移液管,烧杯,恒温箱,高压蒸汽灭菌锅(图31201),pH试纸,酒精灯,放大镜。

牛肉浸膏,蛋白胨,琼脂,氯化钠,5%盐酸溶液,4%氢氧化钠溶液。

 

活动过程

1.采集水样。

采集瓶预先在高压蒸汽灭菌锅内灭菌2小时,然后按《水样的采集和保存》介绍的方法,采集2升水样,盖好瓶盖保存。

2.培养基的配制。

称取3克牛肉浸膏、10克蛋白胨、5克氯化钠、20克琼脂,加入到1升蒸馏水中,加热、搅拌使之溶解,用盐酸和氢氧化钠将溶液pH值调节为7.07.2

3.灭菌。

将培养基、培养皿、锥形瓶、烧杯、移液管等放入高压蒸汽灭菌锅内,灭菌20分钟。

4.细菌总数的测定。

在点燃的酒精灯旁,用灭过菌的移液管吸取1毫升待测水样,注入已灭菌的培养皿中,再注入约15毫升温度约45摄氏度的液态培养基,旋摇培养皿,使水样与培养基充分混合。同时做一个平行样本。待培养基冷却凝固后,翻转培养皿,使底面向上,置于37摄氏度恒温箱内培养24小时。取出后用放大镜观察,统计菌落数。

5.将两个培养皿中菌落数平均一下,计算1毫升水样中的细菌总数。

说明与延伸

1.若检测自来水水样,应先将水龙头用火焰灼烧3分钟灭菌,然后打开水龙头,让水流出5分钟后取水样。

2.计数时,对那些看来相似、距离很近但不相触的菌落,应一一计数。那些紧密接触而外观相异的菌落,也应一一计数。

3.培养基上的菌落数超过300时,要对原水样进行稀释。结果要以测出菌落数乘以稀释倍数。

4.水样采集后,应立即检验。如果放置时间过长,检验结果比实际值偏大。

5.使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时,注意安全,以免被蒸汽灼伤。


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